ABI PCR儀器常見故障維修的原因：

  有很多可能性。這些錯誤的來源通常仍然不明。任何故障排除過程的先檢查協(xié)議并重復(fù)實驗。檢查方案并請有經(jīng)驗的分子生物學(xué)家審查實驗計劃很重要。一位博士后研究員的告誡故事是，在意識到ABI PCR主混合物中缺少dNTP之前運行了幾次失敗的PCR，這提醒我們，即使是精疲力盡的科學(xué)家也容易受到簡單錯誤的影響。

  反應(yīng)組分的預(yù)混料中的錯誤或問題可能是所有樣品和陽性對照擴增失敗的災(zāi)難性原因。重復(fù)實驗之前，請檢查所有組分及其濃度。如果正在使用新一批試劑，則在進行一系列主要實驗之前，對新舊試劑進行對比。

  切換母料產(chǎn)品時，必須認(rèn)識到某些分析方法對緩沖液成分/退火溫度（T a）/引物濃度組合特別敏感。更改其中任何一項可能會導(dǎo)致不同的性能。因此，在進行徹底更改之前，請驗證所選主要混合物中和所有所需儀器上的所有測定法。查看每種預(yù)混液隨附的說明也很重要，因為它們指定了針對給定酶，熱啟動機制和緩沖液成分優(yōu)化的推薦條件。

  ABI PCR儀器熱循環(huán)儀故障維修：

  儀器故障可能會起隱患，因此難以診斷。為避免昂貴的維修費用，請確保所有儀器操作員都經(jīng)過全面的培訓(xùn)并受到的監(jiān)督。一些儀器故障會導(dǎo)致災(zāi)難性故障，從而導(dǎo)致沒有放大或熒光數(shù)據(jù)，而另一些儀器故障會使數(shù)據(jù)失真或以不均勻的方式處理樣品，從而在相同的生物樣品之間造成人為的差異。將對照樣品與對照測定結(jié)合使用對于排除故障非常有用。當(dāng)懷疑儀器出現(xiàn)故障時，應(yīng)在所有孔中進行可靠，優(yōu)化的測定。這種一致性檢查將揭示特定于儀器區(qū)域的問題以及單獨的測定和儀器問題。

  ABI PCR儀器探針檢測失敗維修解決：

   設(shè)計了基于探針的測定法來檢測人cDNA樣品中的EIFB1，但未顯示擴增。初始反應(yīng)在ABi StepOne儀器上使用兼容的試劑進行。嘗試使用200 nM至900 nM的濃度范圍優(yōu)化引物，但沒有改善。檢驗設(shè)計經(jīng)過驗證，發(fā)現(xiàn)適合于靶標(biāo)，并且計算機模擬地預(yù)測這是一種高質(zhì)量的檢驗。合成了新的引物，并使用不同的算子SYBR Green I試劑（因此試劑也有所不同）和儀器（Eppendorf Realplex）與原始合成的等分試樣一起運行。在采用這種方法時，我們注意到主要目標(biāo)是解決問題，而次要目標(biāo)是解釋失敗。該反應(yīng)從兩批引物產(chǎn)生了相等的擴增。在這個階段就顯得反應(yīng)問題鋪設(shè)用探針，并因此新的探針合成和兩個批次是通過在realplex實時儀器第二運營商使用LuminoCt相比®試劑（不同的試劑的那些試圖）。兩種探針均產(chǎn)生擴增數(shù)據(jù)，盡管值得注意的是，原始探針已在測試實驗室之間張貼，因此在室溫下在溶液中放置了幾天，但新探針?biāo)坪醣仍继结樕院谩Ｔ谶@個階段，很顯然，當(dāng)由LuminoCt第二操作運行原始和更換試驗都起作用®在realplex實時熒光定量儀試劑。因此，原始失敗的其余原因被認(rèn)為是：

  操作員：一位經(jīng)驗豐富的科學(xué)家對該實驗進行了多次重復(fù)，因此，這被認(rèn)為是不太可能的解釋。

  儀器：可能因為其他檢測方法失敗而出現(xiàn)問題。

  試劑：測試簡單的解釋。該LuminoCt 試劑相比，使用在ABI StepOne擴增儀兩個寡批。反應(yīng)未能與原試劑，但得到了良好的擴增，LuminoCt ®試劑